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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
含糖子企业自身的繁琐性和不少N-glycoproteins低表达工艺能力因此对N-glycosylation设计的研究工艺的描绘多的近义词吃力。在测量低丰度的N糖基化遮盖蛋清或肽段时,各举掺入大量未遮盖的蛋清肽断,这很简单将低丰度的糖基化遮盖蛋清肽段的走势改变。凝素亲和法是日前糖蛋清质组学中用很广泛的分离法含有工艺。凝集素(lectin)是类糖融合实际实际蛋清质,能爱情专一区分另一特色设计的单糖或聚糖中其他的糖基回文序列而与之融合实际实际,想一想与糖链可逆反应非共价融合实际实际,糖蛋清或糖肽被凝集素捕捉到后面,一般来说用其他的单糖凭借竞争与合作融合实际实际凝集素将糖蛋清或糖肽冲洗掉下。 蛋清质过程酶解后凭借率凝集素(lectin)聚集N-糖基化肽段,完后用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中切去连入在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该正确处理促使Asn氧碳原子量加强2.9890Da。另外用高表面粗糙度LC-MS质谱仪验测脱糖后的肽段,用查找的数据库视图,核对脱糖后氧碳原子量与之理论知识氧碳原子量的发生变化或者糖基化体现肽段的回文序列,于是决定该蛋清质的N-糖基化位点。N-糖基化位点决定完后,再凭借率label-free的目的对其确定酶联免疫法阐述。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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