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DIA蛋白组学揭示:绞股蓝皂苷GP5通过激活自噬有效控制炭疽菌

发布时间:2024-12-03
炭疽病由炭疽菌属造成,是全球最大最紧急的藤本草木情况之四,具备强弄坏性、规划广、染上区间大等优点和缺点。催化灭菌剂仍是特定预防炭疽病的一般科技手段,但滥用权力影响副猪嗜血杆菌体抗药理作用、生态气候干燥源和肉食品质量卫生等情况。藤本草木是纯天然抗白色念珠菌类物质的宝库,的开发藤本草木源灭菌剂具备挑选性强、对非对方怪物相对比较安全性卫生、健康等好处。

2024年11月烟台先进材料与绿色制造山东省实验室杨军丽设计员拜谱生物在Postharvest Biology and Technology杂志上发表题为“Gypenoside GP5 effectively controls Colletotrichum gloeosporioides, an anthracnose fungus, by activating autophagy”文章。研究利用DIA蛋白质组学技术,揭示了绞股蓝皂苷GP5通过激活自噬机制有效控制炭疽菌的机理,为防治炭疽病提供了新的思路。拜谱生物为该研究提供了DIA淀粉酶组学技艺服务。

中文名字题头:绞股蓝皂苷GP5通过激活自噬有效控制炭疽病真菌Colletotrichum gloeosporioides

中文核心期刊:Postharvest Biology and Technology

2026年的影响细胞因子:6.4

文章发表用时:2024年11月

潜在客户基层单位:烟台先进材料与绿色制造山东省实验室

研究分析素材:绞股蓝皂苷GP5处理后的炭疽病真菌C. gloeosporioides

拜谱能提供技巧:DIA血清组学

科研设想:

探讨结局

GP5对炭疽菌的仰生产制反应

通过 菌丝萌发传送速度法测定化合物GP4-GP7对菌丝生长的抑制作用,结果显示GP4-GP7的EC50值分别为96.98、27.5、38.48和61.59 mg/L。其中,GP5表现出最强的抑制效果,在12.5 mg/L浓度下,其抑制效果显著优于其他化合物。当GP5浓度为25 mg/L时,对炭疽菌的抑制率接近50%。此外,GP5的抗真菌活性超过了常用的化学农药百菌清和植物源农药苦参碱(图1)。

图1 GP5以至于结构类型相像性有机物对球孢梭菌菌丝种植的影响到

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

通过显微镜观察观察,发现在GP5浓度为EC50时,孢子萌发受到明显抑制;而在400 mg/L浓度下,孢子完全不萌发。培养8小时后,GP5处理组的孢子萌发率显著低于对照组。在400 mg/L浓度下,孢子芽管长度仅为11.11 μm,而对照组的芽管长度已达到92.70 μm。这表明GP5能够有效抑制炭疽菌孢子的萌发和芽管伸长(图2)。

图2 用EC50和400mg/L溶度治疗GP5后的孢子不断涌现和芽管总长

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024) 探析会发现,GP5可更有效限制水果、巨峰巨峰常见葡萄品种和番茄上的炭疽病斑括展。当GP5溶度可达到500 mg/L时,水果、巨峰巨峰常见葡萄品种和番茄的炭疽病病发率更为明显减低。在1000 mg/L溶度下,GP5对水果、巨峰巨峰常见葡萄品种和番茄的炭疽病都有着更为明显限定制用(图3)。

图3 GP5可仰制球孢梭菌对我的收获果實的毒力

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

GP5正确处理后炭疽菌菌体影响状况

通过扫锚电子无线显微镜观察(SEM)和散发出电子厂显微镜(TEM)观察,发现GP5处理后的炭疽菌菌丝部分脱水,细胞壁结构发生变化(图4)。在400 mg/L浓度下,GP5处理的菌丝细胞壁粘附增强。TEM观察显示,GP5处理后,细胞内的线粒体结构变得模糊,线粒体嵴断裂,细胞器结构难以辨认,并且出现了自噬体和自溶酶体。这些结果表明,GP5通过诱导自噬导致细胞死亡,从而发挥抗菌作用。

图4 GP5操作后的电镜关注

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

通过荧光显微镜观察,发现GP5处理后的炭疽菌细胞中出现大量红色荧光,表明存在大量的酸性囊泡结构,如自噬体和溶酶体(图5)。这与之前的TEM观察结果一致,证实了GP5诱导的自噬现象。此外,GP5处理后,细胞内钙离子(Ca2+)浓度升高,进一步激活自噬系统。

图5 GP5的治疗后的AO印染

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

通过JC-1染色的法检测线粒体膜电位,发现GP5处理后,线粒体膜电位显著下降。随着GP5浓度的增加,红色荧光逐渐减弱,绿色荧光逐渐增强,表明GP5能够诱导线粒体膜损伤,破坏线粒体功能,进而触发线粒体自噬(图6)。

图6 神经细胞内Ca2+有机废气浓度和线粒体膜电势差变换

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

淀粉酶组学深入分析

通过DIA蛋白酶质组学高技术,发现GP5处理后,炭疽菌中有271个蛋白质表达发生显著变化,其中214个上调,57个下调(图7)。GO功能分析显示,差异表达蛋白主要参与代谢过程和细胞过程。KEGG通路分析显示,差异表达蛋白主要富集在有机物质代谢、细胞氮化合物代谢和基因表达等途径。特别是,自噬相关蛋白Atg8的表达上调,进一步证实了GP5通过自噬途径发挥抗真菌作用。

图7 胆固醇质组学结论

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

本文个人总结

研究发现绞股蓝皂苷GP5能够有效抑制炭疽菌的生长和致病性。通过体外实验,GP5显著抑制了炭疽菌菌丝的生长和孢子萌发,其效果优于常用的化学农药氯噻酮和植物源农药苦参碱。进一步的电镜观察和蛋清组学分析显示,GP5通过激活自噬途径,诱导细胞内自噬体和自溶酶体的形成,从而导致炭疽菌细胞死亡。

图8 GP5打败C. gloeosporioides的抗病菌机理。

(图源:Y. Liu, et al., POSTHARVEST BIOL TEC., 2024)

拜谱个人心得体会

研究采用DIA蛋白质组学,揭示了绞股蓝皂苷GP5通过激活自噬机制有效控制炭疽菌的机理。这一发现不仅为防治炭疽病提供了新的思路,还展示了DIA蛋白组学在植物病理学研究中的强大应用潜力。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司,率先引进赛默飞最新一代质谱仪Astral,并且专家团队总结多年DIA蛋白组项目经验,结合Astral质谱仪高稳定性、高灵敏度、高通量、高深度的特性对样品制备、分离技术、算法软件、实验设计全流程进行多维迭代更新,助力蛋白组学检测。此外,拜谱生物还提供转录组学、翻译专业后呈现组、代谢转化组学以及两组学协力食品技术服务,欢迎致电咨询!

借鉴论文文献综述:

Liu Y, Li X, Gong C, et al. Gypenoside GP5 effectively controls Colletotrichum gloeosporioides, an anthracnose fungus, by activating autophagy[J]. Postharvest Biology and Technology, 2025, 220: 113305.
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